۷
۱۳۹۴
گزارش جلسات آزمایشگاه درس میکروبیولوژی
گزارش آزمایشگاه درس میکروبیولوژی
تعداد جلسات : 8
جلسه اول: آشنایی با لوازم آزمایشگاهی
جلسه دوم: مشاهده میکروسکوپی میکروارگانیسمها
جلسه سوم: رنگ آمیزی اسپور
جلسه چهارم: آزمون کاتالاز
جلسه پنجم: استریل کردن پلیتها ولولههای آزمایش
جلسه ششم: موضوع آزمایش: تهیه محیط کشت
جلسه هفتم: جداسازی میکروارگانیسم
جلسه اول: آشنایی با لوازم آزمایشگاهی
در این جلسه ما با انواع لوازم آزمایشگاهی مورد استفاده در آزمایشگاه میکروبیولوژی آشنا شدیم که شرح مختصری از آنها به صورت زیر بود:
– پتریدیش: به صورت یک بار مصرف که از قبل استریل و در بسته بندی مناسب قرار داده شده و همچنین به صورت دائمی یا شیشهای که برای هر بار مصرف باید با حرارت 180 درجه در اتوکلاو استریل کنیم وجود دارند و از آنها برای قرار دادن محیط کشت استفاده می کنیم ، ویژگی آنها این است که سطح تماس زیادی با اکسیژن ایجاد می کنند.
– بورر یا چوب پنبه سوراخ کن که برای ایجاد چاهک در محیط کشت آگار به منظور تست های آنتاگونیستی استفاده می شود همچنین برای سوراخ کردن چوب پنبه.
– اسپاچول یا قاشقک
…
جلسه دوم: مشاهده میکروسکوپی میکروارگانیسمها
در این آزمایش از سه نمونه میکروارگانیسم استفاده کردیم که نمونه A به شکل مایع و دو نمونه BوC به شکل جامد بودند. و همچنین برای مشاهده آنها از دو روش استفاده کردیم:
1) رنگ آمیزی با رنگ کریستال ویوله
2) واکنش در برابر قلیا مثل KOH
روش کار:
لوپ مخصوص جدا کردن میکروارگانیسم را ابتدا در مجاورت شعله استریل و بعد خنک میکنیم سپس در مجاورت شعله مقداری از کشت مایع برداشته و روی لام گسترش میدهیم. برای تهیه گستره از کشتهای جامد کار مشکل تراست، که میتوان از آب مقطر یا انواع بافرها که رایج ترین آنها PBS (بافر فسفاته) است استفاده کنیم. آب مقطر را روی لامها ریخته وبا سوزن از کلنیها مقداری جدا میکنیم و روی قطره آب منتقل میکنیم. سپس گسترشها را در هوا خشک میکنیم و بعد از این که کاملا خشک شدند یک بار به سرعت از روی شعله رد میکنیم تا کاملا تثبیت شوند بعد روی نمونه چند قطره از رنگ کریستال ویوله…
مکانیسم عمل به نحوی است که با استفاده از حرارت نوعی رنگ محلول در آب را در باکتری و اسپور آن نفوذ میدهیم که معمولا رنگ 5% Malachit green است. این رنگ در باکتریها چه دارای اسپور و چه فاقد اسپور نفوذ کرده و فقط در خود اسپور به دلیل داشتن پوسته ضخیم نفوذ نخاهد کرد. برای ورود رنگ به اسپور از حرارت کمک میگیریم و اگر بعد از رنگ آمیزی شستشو دهیم رنگها شسته شده و فقط اسپورها به رنگ سبز باقی میمانند درنتیجه باکتریهای اسپور دار از بدون اسپور متمایز خواهند شد. بعد از شستشو میتوانیم از یک رنگ متضاد استفاذه کنیم که خود این رنگ هم دارای الکل است و در خارج سازی رنگ سبز کمک خواهد کرد. مثلا رنگ سافرالین…
از این روش برای طبقه بندی و شناسایی باکتریها استفاده میشود. برای تشخیص وجود کاتالاز، آنزیم را با سوبسترای آن H2O2 تماس میدهیم و اگر گاز O2 به صورت حباب از آن خارج شود معلوم میشود که کاتالاز وجود داشته است. و به این شکل باکتریها به دو گروه کاتالاز مثبت و کاتالاز منفی تقسیم میشوند….
جلسه پنجم: استریل کردن پلیتها ولولههای آزمایش
برای تهیه محیطهای کشت باید از پلیتهای استریل استفاده کنیم که برای این کار پلیتها و لولههای آزمایش مورد نیاز را در فویلهای مخصوص قرار داده…
جلسه ششم: موضوع آزمایش: تهیه محیط کشت
روش کار:
برای تهیه محیط کشت Notrian brost در ارلن می بایست 8 گرم از محیط کشت را در 1 لیتر آب حل کنیم و چون ما ml90 آب در ارلن داریم، 0.72 گرم از محیط کشت را در آب میریزیم و کاملا هم میزنیم تا به شکل محلول دربیاید. از این محیط آماده شده در سه تا از لولههای استریل …
جلسه هفتم: جداسازی میکروارگانیسم
مهم ترین مسئله محیطی است که از آن جداسازی میکنیم. میتوانیم از محیط مایع یا جامد یا حتی هوا جداسازی کنیم. در مورد محیطهای مایع بسته به غلظت میکروارگانیسم عمل میکنیم اگر غلظت بالا باشد میتوانیم مستقیم نمونه بگیریم…
فایل کامل گزارش کار را از اینجا دانلود کنید.
مطالب مرتبط
فرستادن دیدگاه
اطلاعيه
فرهنگ واژگان تخصصي
فروشگاه کتاب
دستهبندی مطالب
- Breedic (2)
- آگرواکولوژی (۴)
- اسلایدهای پاورپوینت (۴)
- بیوتکنولوژی در کشاورزی (۴۱)
- ترجمه مقاله + اصل مقاله (۱)
- جزوه دانشگاهی و منابع کنکور (۱۲۵)
- دانلود کتب الکترونیکی (e.book) (5)
- علوم دامی (۱)
- فرهنگ واژگان بیوتکنولوژی گیاهی (۲)
- گیاهپزشکی (۱)
- متفرقه (۱۰)
- معرفی کتاب (۱)
- معرفی منابع کنکور ـ گرایش های مختلف (۱۰)
- مقالات (۸)
- نرم افزار (۸)